Os alfaherpesvírus bovinos (αBoHV-1 e αBoHV5)  são agentes etiológicos que causam perdas econômicas devido a perdas reprodutivas e/ou neurológicas em rebanhos bovinos. A espécie bubalina também pode ser acometida por essas estirpes virais, embora exista o Herpesvirus bubalino tipo 1 (αBuHV-1). Todas essas estirpes virais já foram identificadas no Brasil por testes sorológicos e há possibilidade de haver reatividade cruzada entre eles, principalmente entre os αBoHV-5 e αBuHV-1. Por esse motivo, o objetivo desta pesquisa é detectar a presença de αherpesvirus em búfalos abatidos na região de Boituva-SP por métodos tradicionais e moleculares. Como objetivos específicos detectar a presença do αBoHV-5 pela qPCR; realizar o isolamento viral para o αBuHV-1em células MDBK; realizar o sequenciamento completo para estudos de filogenia e avaliar o grau de homologia entre os αBoHV-5 e αBuHV-1; realizar nas amostras de soro o teste de virusneutralização (VN), respectivamente para αBoHV-5 e αBoHV-1; realizar o teste de ELISA indireto capaz de distinguir na mesma placa, o αBoHV-1 e αBuHV-1.O cálculo amostral estimado para esta pesquisa, com base na população bubalina do Censo de 2018 é de 300 animais.Até o momento foram analisados 89 amostras de búfalos (sistema nervoso central e soro), de ambos os sexos, oriundos de sete municípios do Estado de São Paulo: Capão Bonito, Cerqueira Cesar, Cerquilho, Itapetininga, Pariquera-Açu, Salto de Pirapora e Tapiraí. Nos testes moleculares para αBoHV-1 e αBoHV-5, todas as 89 amostras de Sistema nervoso foram negativas. Nos testes sorológicos obteve-se pelo menos um animal reagente em pelo menos um dos testes, a saber: a VN para αBoHV-5 obteve-se 33,7% (30/89) de soropositividade enquanto que para o αBoHV-1 e αBuHV-1 nem todas as amostras de soro foram realizadas na totalidade, ou seja, para αBoHV-1 obteve-se 34,5% (29/84) e para αBuHV-1 foi de  26,3% (20/76) de soropositividade. Destaca-se, que por este kit de ELISA distinguir entre o αBoHV-1 e αBuHV-1 na mesma placa, as amostras que havia dado sorologia positiva na VN de αBoHV-1 foram negativas no teste de ELISA. Com exceção dos municípios de Cerquilho e Tapiraí, os demais apresentaram, no mínimo, um animal positivo para um dos virus; 8 animais apresentaram reatividade cruzada entre os αBoHV-1 e αBoHV-5 e 19 animais apresentaram reatividade cruzada entre as três estirpes. Resultados preliminares indicam que há forte correlação entre αBoHV-5 e αBuHV-1.